چکیده

 

پیوند کلیه راهکار درمانی برای بیماران مبتلا به مرحله نهایی بیماری کلیوی است. با وجود افزایش و پیشرفت چشمگیر این روند درمانی، هنوز به دلیل پاسخ ایمنی فرد گیرنده در برابر بافت دهنده، رد پیوند شایع و عامل اصلی عدم موفقیت این روش است. کلیه پیوندی مستعد قرار گرفتن در معرض رد حاد به دلایل متفاوت از جمله استرس­های اکسیداتیو است. استرس اکسیداتیو با تاثیر منفی بر عمر و عملکرد بافت پیوندی می­تواند نهایتا منجر به رد پیوند گردد. آنزیم­های GPX1 و SOD1 از جمله آنزیم­های آنتی­اکسیدان هستند. هدف از این پژوهش بررسی ارتباط چندشکلی­­های GPX1 pro198leu (rs1050450) وA251G   SOD1(rs2070424) با رد حاد پیوند کلیه است. در این مطالعه 262 بیمار دریافت کننده پیوند کلیه که 46 نفر از آن­ها دارای رد حاد بودند و 262 فرد سالم به عنوان کنترل مورد بررسی قرار گرفتند. تعیین ژنوتیپ­ها با روش PCR-RFLP انجام و داده­ها توسط نرم­افراز  آماری SPSS تحلیل شدند. پس از بررسی فراوانی آللی و ژنوتیپی در چندشکلی pro198leu  GPX1 بین دو گروه بیمار و کنترل و همچنین بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه تفاوت معناداری مشاهده نشد. به عبارت دیگر فراوانی آللی و ژنوتیپی ژن GPX1 در چندشکلی یاد شده در بروز بیماری­های کلیوی منجر به پیوند و همچنین رد حاد پیوند کلیه نقشی ندارد. در بررسی چندشکلی A251G از ژن SOD1 نیز اختلاف معناداری میان دو گروه شاهد و بیمار و دارای رد پیوند و فاقد رد حاد پیوند مشاهده نشد. نتایج نشان می­دهند که چندشکلی SOD1 A251G در ابتلا به بیماری­های منجر به پیوند کلیه و همین­طور رد حاد پیوند دخیل نیست.

 

واژگان کلیدی: پیوند کلیه، رد حاد، استرس اکسیداتیو، GPX1، SOD1

 

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                صفحه

 

فصل اول: مقدمه

1-1-       پیوندکلیه ………………………………………………………………………………………………………………. 2
1-2-       رد پیوند ………………………………………………………………………………………………………………… 3
   1-2-1- رد فوق حاد ……………………………………………………………………………………………………… 3
   1-2-2-  رد حاد …………………………………………………………………………………………………………….. 4
   1-2-3- رد مزمن …………………………………………………………………………………………………………… 4
1-3-       پیشگیری از رد آلوگرافت ……………………………………………………………………………………… 5
1-4-       استرس اکسیداتیو …………………………………………………………………………………………………. 7
1-5-       گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) ………………………………………………………………………….. 8
1-6-       سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) ……………………………………………………………………………. 9
1-7-       هدف ……………………………………………………………………………………………………………………… 11
1-8-       فرضیه ……………………………………………………………………………………………………………………. 11

 

فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 pro198leu و ارتباط آن با بیماری­های گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………

 

13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری­ های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..

 

14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………….. 15

 

فصل سوم: مواد و روش انجام کار

3-1- نمونه­گیری ………………………………………………………………………………………………………………… 18
3-2- وسایل مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………. 19
3-3- مواد مورد استفاده …………………………………………………………………………………………………….. 19
   3-3-1- محلول­های لازم جهت استخراج ……………………………………………………………………… 19
   3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ………………………………………………………………. 20
   3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ……………………………………………………….. 20
   3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده ………………………………….. 20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ………………. 21
   3-4-1- ساخت محلول­های مورد نیاز جهت استخراج ………………………………………………….. 21
   3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن …………………………………………………………………. 21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش  PCR-RFLP ……………………………………………………………………… 21
   3-5-1- PCR ………………………………………………………………………………………………………………… 21
   3-5-2- پرایمر­های مورد استفاده ………………………………………………………………………………….. 22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ……………………………………………….. 23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G …………………………………………………….. 24
3-8- الکتروفورز …………………………………………………………………………………………………………………. 25
3-9- رنگ­آمیزی ژل ………………………………………………………………………………………………………….. 26
3-10- تحلیل آماری ………………………………………………………………………………………………………….. 27

برای دانلود پایان نامه اینجا کلیک کنید

 

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...